CRISPR/Cas9基因敲除技術(shù)服務(wù) 服務(wù)編號：SV1501

一. CRISPR/Cas9技術(shù)介紹

      CRISPR/Cas9 是一種基于細菌天然免疫機制開(kāi)發(fā)出的基因編輯技術(shù)，用于抵御病毒等外來(lái)物入侵的一種防御機制。經(jīng)改造的CRISPR系統主要由Cas9蛋白和單鏈向導RNA（sgRNA）組成，其中sgRNA對靶序列進(jìn)行特異性識別，Cas9蛋白負責對識別的靶序列進(jìn)行切割，從而實(shí)現DNA的雙鏈斷裂。

      DNA雙鏈斷裂后，細胞對DNA的損傷修復機制就會(huì )被激活。目前主要由兩種修復機制，非同源末端連接（NHEJ）修復和同源重組介導的修復（HDR）。沒(méi)有外源模板時(shí)，機體主要進(jìn)行NHEJ修復。NHEJ修復過(guò)程中，會(huì )在切割位點(diǎn)隨機的進(jìn)行缺失或插入堿基序列，導致DNA移碼突變，從而使基因不能正常表達。存在外源模板的情況下，機體會(huì )啟動(dòng)HDR修復來(lái)實(shí)現基因的精準插入或者替換。

二．服務(wù)內容與流程

服務(wù)內容：

Tip: 請您填寫(xiě)項目申請表，以便Bioss為您提供更好的技術(shù)服務(wù)。

服務(wù)流程：

1. 客戶(hù)提供需要敲除的指標信息，與公司商定具體的制備項目、數量和費用，雙方簽訂《委托CRISPR/Cas9基因敲除服務(wù)合同》。

2. 雙方確定合作細節，實(shí)驗過(guò)程中及時(shí)反饋實(shí)驗進(jìn)程，并按照規定時(shí)間完成委托服務(wù)。并向客戶(hù)提供委托產(chǎn)品與實(shí)驗報告。

三．技術(shù)流程

1.RNP轉染法

2.質(zhì)粒轉染法

四．案例結果展示

五．服務(wù)優(yōu)勢

1. 兩種敲除方法（質(zhì)粒法和RNP法）可供客戶(hù)選擇。

2. 每個(gè)靶標設計多條sgRNA，提供多種敲除策略，最大限度的提高的KO效率，提高蛋白水平的敲除概率。

3. 通過(guò)Sanger測序后，多種軟件分析編輯效率，提高編輯結果的準確性。

4. 不同的細胞系具有專(zhuān)屬的轉染方案，提高靶標編輯的效率。