Annexin V-FITC細胞凋亡檢測試劑盒(Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit)是用FITC標記的重組人Annexin V來(lái)檢測細胞凋亡時(shí)出現在細胞膜表面的磷酯酰絲氨酸（phosphatidylserine，簡(jiǎn)稱(chēng)PS）的一種細胞凋亡檢測試劑盒?？梢允褂昧魇郊毎麅x、熒光顯微鏡或其它熒光 檢測設備進(jìn)行檢測。

檢測原理

凋亡早期，細胞膜上的磷脂酰絲氨酸（PS）會(huì )從膜內翻到膜外，這是凋亡的一個(gè)典型特征，細胞凋亡處于早期階段時(shí)，僅有PS外翻，而細胞膜仍然完整，隨著(zhù)凋亡進(jìn)程的推移，細胞除了PS外翻以外，細胞膜通透性會(huì )改變，可以簡(jiǎn)單的理解成凋亡后期，細胞膜有穿孔的現象。

Annexin V凋亡檢測試劑盒一般包含3個(gè)組分：兩個(gè)染料和一個(gè)為Annexin V標記提供鈣離子環(huán)境的Binding Buffer。Annexin V本質(zhì)是一個(gè)在鈣離子環(huán)境下，能夠與磷脂酰絲氨酸高度特異性結合的膜聯(lián)蛋白，通過(guò)在該蛋白上標記的熒光基團，來(lái)標記凋亡細胞，然后再搭配只能夠進(jìn)入受損細胞膜的核酸染料，就可以達到區分各階段細胞的目的了。

細胞分為三類(lèi)：一是無(wú)PS外翻，也沒(méi)有細胞膜破裂的健康細胞（兩個(gè)染料都染不上），二是處于早期凋亡，有PS外翻但是細胞膜完好的細胞（可以染上Annexin V-FITC，不能染上PI），三是處于晚期凋亡階段，既存在PS外翻，也存在細胞膜破裂的晚期凋亡細胞（兩種染料均可染上）。染完色后通過(guò)流式細胞儀，就能夠對細胞群體進(jìn)行定量和分析了。

Bioss Annexin V-FITC細胞凋亡檢測試劑盒介紹

產(chǎn)品特點(diǎn)

Bioss自主研發(fā)產(chǎn)品，染色效果優(yōu)于國際高價(jià)格品牌！
調亡細胞群分群清晰，且細胞群集中！
不同檢測方案，信號更強更靈敏！
操作簡(jiǎn)便，省時(shí)又省力，加入PI 后5min可直接上機檢測！

BA00101檢測數據

A. 流式細胞儀分析：

AF488最大激發(fā)波長(cháng)為488nm，最大發(fā)射波長(cháng)519nm；PI-DNA復合物的最大激發(fā)波長(cháng)為 535nm， 最大發(fā)射波長(cháng)為615nm。用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制散點(diǎn)圖，AF488為橫坐標，PI為縱坐標。典型實(shí)驗中的細胞可以分成三個(gè)亞群，活細胞僅有很低強度的自發(fā)熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色及紅色熒光雙重染色。

B. 熒光顯微鏡分析：

懸浮細胞：滴一滴用 AnnexinV-AF488/PI 雙染的細胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細胞。

貼壁細胞：可直接用蓋玻片培養細胞并誘導細胞凋亡。

在熒光顯微鏡下用雙色濾光片觀(guān)察。早期凋亡細胞僅有綠色熒光信號，晚期凋亡細胞有綠色及紅色熒光雙重染色。

Annexin V單染(左)、PI單染(中)、Annexin V/PI雙染(右)

Bioss產(chǎn)品與國際品牌檢測結果對比示例

Protocol:

Jurkat 細胞生長(cháng)至對數生長(cháng)期時(shí)，分別經(jīng)過(guò)紫外誘導0秒、15秒、30秒后，繼續培養4h后加入Annexin V-FITC / PI檢測。

Result：

Bioss

e品牌

k品牌

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