你有沒(méi)有經(jīng)歷過(guò)這樣的崩潰時(shí)刻？辛辛苦苦做的WB條帶突然消失，免疫熒光染色結果慘不忍睹，甚至復現師兄的實(shí)驗卻得出南轅北轍的結果？這不是你的技術(shù)有問(wèn)題，而是科研抗體的“通病”——特異性不足、重現性差，正在悄悄毀掉你的研究成果~
行業(yè)痛點(diǎn)：抗體市場(chǎng)的“隱形殺手”
在生物醫藥領(lǐng)域，抗體是實(shí)驗的“剛需工具”，卻也是公認的“不確定因素”。據Baker M.(2016)《Nature》(doi:10.1038/533452a)統計，超70%的科研人員無(wú)法重復他人實(shí)驗結果，過(guò)半人甚至無(wú)法復現自己的數據。這背后的罪魁禍首，正是抗體的兩大硬傷：特異性不足及批次差異大。 許多實(shí)驗室被迫“賭運氣”，用大量時(shí)間和經(jīng)費試錯，結果往往是“竹籃打水一場(chǎng)空”。
KO驗證：抗體特異性的“照妖鏡”
目前接受度最廣且最受信任的抗體特異性驗證方法是基因敲除(Knock-out, KO)驗證。KO驗證是抗體特異性驗證的金標準。在一個(gè)敲除細胞株中，由于表達特定靶標蛋白的基因被敲除，蛋白靶標并不存在。如果抗體是特異的，在敲除細胞株中就不會(huì )檢測到結果，但在對照細胞株（或野生型細胞株）中就會(huì )檢測到特定的信號。與野生型相比，KO中的信號丟失是抗體特異性的最可靠證據，也說(shuō)明抗體專(zhuān)一得“死心塌地”。
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| 類(lèi)型 | 細胞系貨號 | 裂解液貨號 | 指標名稱(chēng) | Uniprot | Gene ID |
| 優(yōu)質(zhì)KO細胞系推薦 | K004-4-4P | K004-4-4PL | EGFR | P00533 | 1956 |
| K024-1-4P | K024-1-4PL | Caspase-3 | P42574 | 836 | |
| 上新推薦 | K083-1-3P | K083-1-3PL | SLK | P06241 | 2534 |
| K086-1-2P | K086-1-2PL | Bcl-XL | Q07817 | 598 | |
| K087-1-1M | K087-1-1ML | RalA | P11233 | 5898 | |
| K088-1-3P | K088-1-3PL | Calreticulin | P27797 | 811 |
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科研人的“避坑指南”
抗體實(shí)驗翻車(chē)并不可怕，可怕的是在錯誤的道路上越走越遠。選擇經(jīng)過(guò)KO/KD驗證的高特異性抗體，就像給實(shí)驗上了“雙保險”——既節省時(shí)間成本，又提升成果可信度?？蒲袩o(wú)捷徑，但好的工具能讓努力事半功倍。告別“玄學(xué)實(shí)驗”，從選擇可靠的抗體開(kāi)始！
Caspase-3 Recombinant Rabbit mAb
WB｜Hela cell
細胞系貨號：K024-1-4P裂解液貨號：K024-1-4PL
EGFR Recombinant Rabbit mAb
ICC｜A549(left) cell and EGFR knockout A549(right) cell
細胞系貨號：K004-4-4P
EGFR Rabbit pAb
WB｜A549 cell
細胞系貨號：K004-4-4P
裂解液貨號：K004-4-4PL
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